Серада Плоскирева (бактоагар Ж): апісанне. медыцынская мікрабіялогія

Серада Плоскирева (названая яшчэ бактоагаром Ж) з'яўляецца пажыўным асяроддзем для вырошчвання некаторых мікраарганізмаў, у асноўным шыгел і сальманел. Як крыніца для яе выкарыстоўваюць інфікаваныя матэрыялы: мачу, жоўць, спаражнення.

гісторыя

Мікалай Іванавіч Плоскирев - савецкі мікрабіёлаг і заслужаны ўрач РСФСР. Ён нарадзіўся ў 1869 і памёр у 1948, большую частку жыцця прапрацаваўшы ў родным горадзе - Томску.

У 1888 годзе ён, будучы навуковец, не скончыўшы шосты клас школы, паступіў на ваенную службу. Скончыць навучанне ён змог толькі 1892 г., пасля чаго здаў экзамены на паступленне ў Імператарскі Томскі універсітэт, вучыўся на медыцынскім факультэце. У 1898 годзе атрымаў званне лекара.

Плоскирев удзельнічаў у руска-японскай вайне, а пасля яе працаваў у Томскам шпіталі. У 1910 годзе прызначаны на пасаду кіраўніка томскай скурна-венералагічнага бальніцы і на працягу трыццаці гадоў быў яе нязменным кіраўніком. Гэтак жа вучоны з'яўляўся адным з заснавальнікаў скурна-венералагічнага дыспансера ў Томску.

Мікалай Іванавіч Плоскирев напісаў цэлую серыю работ, прысвечаных барацьбе з венералагічнага захворваннямі.

склад

Серада Плоскирева - матэрыял для культывавання кішачных бактэрый, а значыць, павінна ўтрымліваць некалькі відаў пажыўных рэчываў. Выпускаецца яна ў сухім выглядзе.

Даволі вялікую долю ў яе агульнай масе мае панкрэатычны гідралізат кількі (10,4 г / л). Крыху менш прыпадае на двузамещенный гидроцитрат натрыю (8,5 г / л). Таксама тут утрымліваецца сухі пажыўны булён і малочны цукар (8,62 і 7,3 г / л).

Другая назва асяроддзя Плоскирева - бактоагар Ж. У складзе яго прысутнічае агар ў колькасці 6,94 г / л. Змест бязводнага сериоватистокислого натрыю роўна 5,1 г / л. Маецца наяўнасць абязводжанай фасфату динатрия - 2,1 г / л, натрыевых соляў жоўцевых кіслот каля 3,46 г / л, а кальцыніраванай соды - 2,4 г.

Менш грама ўтрымліваецца ў ёй індыкатараў - нейтральнага чырвонага (0,05) і дыяментавага зялёнага (0,0002). Змест ёду - 0,13.

прымяненне

Вывучэнне біяхімічных працэсаў бактэрый гуляе вельмі важную ролю ў дыягностыцы захворванняў, якія выклікаюць анаэробныя арганізмы. Відаў, якія ўваходзяць у гэтае сямейства, - сотні. Яны практычна ідэнтычныя ў марфалогіі і культуральной уласцівасцях, і самы надзейны спосаб адрозніць іх адзін ад аднаго - гэта вывучэнне біяхіміі.

Даследаванне пачынаецца з засявання паталагічнага матэрыялу ў пажыўнае асяроддзе. Яна дыферэнцыяльна-паталагічная для кішачнай групы бактэрый, і ў склад яе, апроч мясопептонного агара, уваходзяць індыкатар і лактоза. Здольнасць перапрацоўкі лактозы - важны прыкмета дыферэнцыяцыі энтеробактерий. Калі гэта выяўляецца, то pH ссоўваецца ў бок кіслотнасці і спрацоўвае індыкатар, які афарбоўвае калонію.

У іншых краінах могуць выкарыстоўвацца іншыя пажыўныя асяроддзя, але механізм іх дзеяння адпавядае тром найбольш распаўсюджаным у Расіі - гэта асяроддзя Энда, Левіна і асяроддзе Плоскирева.

апісанне метаду

За мяжой аналагам асяроддзя Плоскирева з'яўляецца так званы MacConkey Agar. У гатовым выглядзе раствор празрысты, мае лёгкі ружавата-жоўты адценне. Калоніі, здольныя перапрацоўваць лактозу, у асяроддзі Плоскирева даюць чырвоны (бруснічный) колер. Калі ж бактэрыя не можа перапрацоўваць яе, калонія альбо бясколерная альбо мае слабы афарбоўка.

З прычыны таго што ў склад асяроддзя Плоскирева уваходзяць рэчывы-інгібітары (дыяментавы зялёны, жоўцевыя солі, ёд), яна фактычна цалкам душыць рост грамположительной флоры, а ў першыя суткі значна затрымлівае рост эшехирий, а так жа іншы што спадарожнічае мікрафлоры.

другі этап

Далей адбываецца адбор цікавіць калоніі, і яна засяваецца на асяроддзя першаснай дыферэнцыяцыі і назапашвання. Асяроддзя, на якіх адбываецца засеў, павінны ўтрымліваць некалькі субстратаў. Бактэрыяльная культура павінна выявіць ферментатыўную актыўнасць па адносінах да іх, да таго ж асяроддзя размяшчаюцца ў прабірках так, каб было два ўчасткі:

• той, на якім агар скошаны;
• са слупком.

Якая цікавіць даследчыка калонія засяляецца на скошаную частку шчыльным рыскай, а ў слупок - ўколам. На гэтым этапе выкарыстоўваюцца асяроддзя Рессела, Клиглера або Олькеницкого. Як дыферэнцыяльна-дыягнастычная выкарыстоўваецца і асяроддзе Плоскирева.

Мікрабіялогія і патагенныя арганізмы

Агар Плоскирева з'яўляецца важным фактарам у выяўленні інфекцый, выкліканых энтеробактериями. Так, напрыклад, на ёй вырошчваюць і дыферэнцыююцца калоніі мікраарганізмаў, якія з'яўляюцца ўзбуджальнікамі бактэрыяльнай дызентэрыі. Гэта анаэробныя арганізмы, якія ўваходзяць у род Schigella.

Падобна ўсім, хто з'яўляецца часткай сямейства кішачных бактэрый, шыгел маюць выгляд палачак, памерам два мікраметра. Яны не ўтвараюць капсул і спрэчка, не маюць жгутиков - гэта дазваляе іх адрозніваць ад сальманел, якія, у сваю чаргу, рухомыя. Яны выдатна растуць на самых простых асяроддзях, пры тэмпературы ледзь вышэй пакаёвай (35-37 ° С) і 7,4 pH. Па характары росту, калоніі не адрозніваюцца ад сальманел.

Як гаварылася вышэй, мікраарганізмы могуць практычна не мець марфалагічных адрозненняў, аднак істотна адрознівацца ў біяхімічных працэсах жыццядзейнасці. Так, выключаючы шыгел Ньюкестл, пры ферментацыі вугляводаў адбываецца адукацыя кіслаты без газу. За выключэннем шыгел Зонне, яны не могуць ферментаваны лактозу, але расшчапляюць глюкозу. Гэтак жа да іх ключавым асаблівасцяў можна занясі тое, што яны могуць рэдукаваць нираты ў нітрыты. Іх калоніі не расшчапляюць мачавіну, а гэтак жа ў пажыўнай асяроддзі не адбываецца разрэджвання жэлаціну.

Збор і падрыхтоўка пасяўнога матэрыялу

Каб выявіць узбуджальнікаў дызентэрыі, неабходныя мікрабіялагічныя даследаванні заражаных асяроддзяў, то ёсць спаражненняў хворага. Пасля атрымання матэрыялу, неабходна як мага хутчэй рабіць пасеў. Калі гэта немагчыма, крыніца трэба змясціць у кансэрвуе рэчывы - фасфатныя буферную сумесь або гліцэрына. Пры тэмпературы 4 ° С яны могуць захоўвацца не больш за суткі. Збор матэрыялу неабходна вырабляць пры дапамозе рэктальнай шкляной трубкі, якая ўводзіцца ў прамую кішку.

Для даследавання з матэрыялу выбіраюцца гнойна-слізістыя кавалачкі, якія павінны быць прамытыя ў двух-трох прабірках ізатанічнага раствора хларыду натрыю.

Нанясенне патагенных бактэрый на сераду Плоскирева вырабляецца шкляным шпателем. Неабходна на невялікім участку ўцерці яго ў агар, потым адарваць шпатель ад асяроддзя, а рэшткавы матэрыял ўцерці ў незасеяную паверхню. Калі пасеў робіцца ў некалькі кубкаў, то ў кожную з іх трэба засяваць новую порцыю.

Калі слізістай-гнойных кавалачкаў няма ва ўзятых на аналіз вылучэннях, гэта яшчэ не значыць, што там не прысутнічаюць патагенныя мікраарганізмы. У такім выпадку неабходна эмульгировать фекаліі ў 10 мл раствора хларыду натрыю (канцэнтрацыя 0,85%), затым засеяць адну ці дзве кроплі на сераду Плоскирева. Неэмульгированный крэсла можна засяваць ў салянітавым булён. Ён жа выкарыстоўваецца, калі замест фекаліяў маюцца ванітавыя масы або прамыўныя вады.

мікрабіялагічная дыягностыка

На першым этапе мікрабіялагічнага даследавання праводзіцца засеў патагенных бактэрый у два кубкі, каб затым назіраць, як растуць шыгел. На асяроддзі Плоскирева вырабляецца адзін пасеў, другі ж - на асяроддзі Левіна або Энда.

З прычыны таго што з'явіліся штамы шыгел, ўстойлівыя да антыбіётыкаў, да серадах дадаецца левамецытын. Затым на працягу сутак адбываецца інкубацыя ў тэрмастаце пры тэмпературы 37 ° С.

На другі дзень трэба вывучыць якія вырасьлі калоніі. Тыя, што не на дыферэнцыяльна-дыягнастычнай асяроддзі выраслі бясколернымі, неабходна адсеяць на сераду Ресселя або кароткі "стракаты шэраг". Далей даследаванне праводзіцца па алгарытме першасных пасеваў на іх. Калоніі шыгел на асяроддзі Плоскирева растуць у выглядзе празрыстых, бескаляровых і дробных калон. Яны бываюць двух відаў:

• пляскатыя з вышчэрбленымі бакамі;
• круглявыя, выпуклыя, з характэрным вільготным бляскам.

Тры-чатыры калоніі неабходна микроскопировать і даследаваць на рухомасць. У выпадку, калі апошняй не выяўляецца, іх перасяляюць на сераду Олькеницкого, каб вылучыць чыстую культуру. Пры адсутнасці характэрных калоній шыгел ці калі не назіраецца наогул ніякага росту, неабходна на агар Энда або Плоскирева вырабляць высяванне з салянітавым булёна. Калі тыповыя калоніі прысутнічаюць у дастатковай колькасці, ставіцца арыенціровачны рэакцыя аглютынацыі. Выкарыстоўваецца сумесь сываратак Зонне і Флекснера, рэакцыя праходзіць на шкле.

далейшае даследаванне

У трэці дзень адзначаюцца змены, якія адбыліся ў калоніях на асяроддзі Ресселя. Калі ёсць культура, якая не раскладае лактозу, а глюкозу зброджваць з адукацыяй кіслаты, яе аддзяляюць і даследуюць, праводзяць мікраскапію, а таксама праводзяць пасеў на "стракаты шэраг", аднак на гэты раз разгорнуты. Гэтак жа ставіцца рэакцыя аглютынацыі, у мэтах сералагічныя ідэнтыфікацыі.

У апошні дзень можна зрабіць выснову на падставе змяненняў у "стракатым шэрагу" (ці адбываецца ферментацыя вугляводаў), а гэтак жа падводзяцца вынікі рэакцыі аглютынацыі.

Захоўванне i падрыхтоўка

Падрыхтоўка агара Плоскирева адбываецца такім чынам:

1. 55 г сухога рэчыва размешваюць у літры дыстыляванай вады.
2. Кіпяцяць на працягу двух-трох хвілін, да таго часу, пакуль агар цалкам не расплавіцца.
3. Разліваюць у кубкі Петры (стэрыльнасць неабавязковая) пластом у 5-6 мм.
4. Кубкі пакідаюць адкрытымі на паўтары гадзіны пры пакаёвай тэмпература (18-25 градусаў). Па заканчэнні гэтага часу асяроддзе досыць застыне і падсушыць.

Серада Плоскирева святлоадчувальных і гіграскапічная. Парашок неабходна захоўваць у герметычным пакаванні, адносная вільготнасць паветра ў памяшканні не павінна перавышаць 60%. Аптымальная тэмпература для захоўвання ад 2 ° С да 25 ° С. Неабходна прытрымлівацца прыведзеныя правілы захоўвання, у іншым выпадку магчымыя недакладныя вынікі даследаванняў.