Витрификация эмбрыёнаў на індывідуальных носьбітах

У дадзеным артыкуле пойдзе гаворка пра такое паняцце, як витрификация эмбрыёнаў. Доктарам Масашиге Куваямой быў вынайдзены дадзены метад на криотопах яшчэ ў двухтысячным годзе. Першае дзіця народжаны дзякуючы витрификационным эмбрыёны ў 2003 годзе. Выжывальнасць ооцитов была павялічана на 98 працэнтаў.

У паловы жанчын, якім прызначаюць экстракарпаральнае апладненне, застаюцца эмбрыёны. Для іх праводзіцца криоконсервация, што дазваляе эканоміць грашовыя сродкі пацыентак. Бо размарозіць і перанесці зародкі значна прасцей, чым правесці працэдуру экстракарпаральнага апладнення нанова. Таксама гэта свайго роду страхоўка на той выпадак, калі жанчына не зацяжарыць. Криоконсервация мае бясспрэчную перавагу - прадухіляецца гібель жыццяздольных эмбрыёнаў, якія засталіся пасля пратаколу.

антагенез

Працягу суб'ектыўнага развіцця арганізма, або антагенез, бярэ свой пачатак яшчэ з моманту апладнення і канчаецца яму захад. Гэты рух бесперапынна ў часе і мае непапраўную характар. І мы ніяк не можам яго прыпыніць ці запаволіць яго развіццё. Але ў прыродзе ёсць выключэнні. Гэта расліны, бесхрыбетныя жывёлы і нават некаторыя элементарныя пазваночныя, якія пры нізкай тэмпературы не праяўляюць ўласцівасці, характэрныя для жывых арганізмаў.

Што такое анабіёз?

Витрификацию эмбрыёнаў разгледзім ніжэй. Індывідуальны перыяд спакою называецца анабіёзу. Так, напрыклад, многія сібірскія жывёлы перажываюць тэмпературу, якая дасягае -90 градусаў, і амаль поўная абязводжванне. Пры вывучэнні дадзенага перыяду антагенезу ў прыродных умовах узнікае пытанне аб магчымым ужыванні паніжаных тэмператур для частковага і зварачальна перапынення функцыянавання вышэйшых пазваночных істот, у тым ліку і чалавека.

Криоконсервирование

Криоконсервирование - гэта дзейсны метад прыпынення біялагічных працэсаў у клетках шляхам уздзеяння нізкай тэмпературы. Пры гэтым захоўваецца жыццядзейнасць клетак у ходзе падагрэву. Па папулярнасці дадзены спосаб саступае витрификации эмбрыёнаў. 1 криотоп (маркіраваны крионоситель) змяшчае ад 1 да 3 зародкаў.

Напрыклад, пры выкананні такой працэдуры, як ЭКА, найлепшым дзеяннем лічыцца перасоўванне ў паражніну маткі не больш за два эмбрыёнаў. Тыя, што засталіся якасныя эмбрыёны могуць криоконсервироваться для выкарыстання ў далейшым. Іх таксама можна ўжыць для паўторнага правядзення ЭКА праз некаторы час, калі працэдура пакажа адмоўны вынік. З такімі мэтамі праводзіцца витрификация эмбрыёнаў на індывідуальных носьбітах.

У некаторых выпадках замарожваюцца ўсе эмбрыёны. Для жанчын, якія маюць сіндром гиперстимуляции яечнікаў пры індукцыі суперовуляции, гэта праводзіцца найбольш часта. Каму яшчэ рэкамендавана замарозка? Пацыенткам, якія маюць анкалагічныя захворванні, у прыватнасці перад працэдурай хіміятэрапіі або радыётэрапіі. Затым дадзеныя зародкі пераносяцца ў паражніну маткі. Замарозка паказана ўсім, у каго верагоднасць наступлення цяжарнасці пасля ЭКА па нейкіх прычынах паніжаная. Гэта можа быць паліп эндаметрыя, недастатковая таўшчыня эндаметрыя да таго моманту, калі плануецца перанос, Дысфункцыянальныя крывацёк.

этапы замаразкі

Эмбрыёны замарожваюць на розных этапах:

• аплодненая яйкаклетка (зігота);
• этап драбнення эмбрыёнаў;
• бластоціста.

На дадзены момант ёсць два спосабу замаразкі эмбрыёнаў.

павольная замарозка

Витрификация эмбрыёнаў праводзіцца пры павольнай замарозцы. Такі спосаб быў прапанаваны яшчэ ў 70-х гадах і з'яўляецца адным з першых класічных метадаў замаразкі эмбрыёнаў. Ён грунтуецца на павольным астуджэнні з пастаяннай хуткасцю. Пасля эмбрыёны захоўваюцца ў вадкім азоце.

Але неабходна заўважыць, што пры павольнай замарозцы ў криопротекторном растворы ўтвараюцца мікраскапічныя крышталі лёду, якія негатыўна ўплываюць на клеткі эмбрыёна. Гэта можа справакаваць частковую ці поўную гібель биоматериала пры отогреве. Колькасць эмбрыёнаў, паспяхова перанесеных у працэсе павольнага замарожвання і отогрева, складае прыкладна 70 адсоткаў.

Витрификация

Пасля 2010 года сталі ўжываць новы і больш дзейсны метад криоконсервирования - витрификацию. У параўнанні з папярэднім метадам, гэта звышхуткі спосаб замаразкі биоматериала. Часцей за ўсё праводзіцца витрификация эмбрыёнаў пасля ПГД (генетычнай дыягностыкі).

Пры выкарыстанні дадзенай працэдуры криопротекторный раствор, куды зьмяшчаюць эмбрыёны, не ўтварае крышталяў лёду пры замарожванні. Такім чынам, зніжаецца верагоднасць парушэння эмбрыёна. Прыярытэтам дадзенага метаду з'яўляецца не толькі спосаб замарожвання, але яшчэ і адсотак выжывання зародкаў пасля отогрева. Па статыстыцы, колькасць тых, хто выжыў пасля працэсу витрификации эмбрыёнаў складае не менш за 95 працэнтаў.

Што адбываецца пасля отогрева?

Пасля отогрева эмбрыёны амаль не адрозніваюцца ад звычайных зародкаў. Яны так жа добра прыжываюцца і развіваюцца. Пры отогреве ўсе эмбрыёны падвяргаюць працэсу дапаможнага хэтчинга. Пры правядзенні гэтага дзеяння павярхоўны пласт эмбрыёна падзяляецца лазерным прамянём пад патрэбным і бяспечным вуглом. Гэта палягчае выхад эмбрыёна з абалонкі і павялічвае магчымасць паспяховай перасадкі ў паражніну маткі.

Замарожванне дае магчымасць захоўвання эмбрыёнаў працяглы час. Гэты працэс з'яўляецца эканамічнай выгадным, паколькі кошт захавання, отогрева і ўжыўлення эмбрыёна ў паражніну маткі менш, чым паўторны працэс экстракарпаральнага апладнення.

Витрификацию разглядаюць як паэтапны пераход, дзе халодны раствор пры астуджэнні ніжэй тэмпературы стеклования. Пры гэтым ён застаецца аморфным, атрымлівае будынак шкла і якасць, аналагічнае крышталічным цвёрдым целам. Такім чынам, і жывыя клеткі, і нават цэлы эмбрыён ператвараюцца ў "шкло". Стеклообразная структура вадкасці пры витрификации атрымліваецца з-за яе хуткага астуджэння, то ёсць энтрапія вадкасці зніжаецца за меншы прамежак часу, чым энтрапія неабходнай крышталічнай структуры.

Простымі словамі, вадкасць не замярзае пры набліжэнні яе энтрапіі да энтрапіі крышталя. Але для таго каб правільна витрифицировать жывы арганізм, трэба дасягнуць хуткасці заняпаду тэмператур ≈ 108 ° C / мін., А гэта на практыцы немагчыма, таму што ў ужывальнай крыягеннай вадкасці недастатковая для гэтага тэмпература, і нельга выкарыстоўваць витрифицируемый раствор ў меншым аб'ёме, чым аб'ём ооцита. Гэта ўсё і мяркуе витрификация эмбрыёнаў. Што гэта такое, цяпер стала больш-менш зразумела.

Навукоўцы змаглі даказаць што прыбаўка ў сераду для замаразкі криопротекторов дае магчымасць хутка панізіць хуткасць замаразкі. Значыць, пры шчыльнасці 10% этиленглиголя і пропіленгліколь хуткасць значна зніжаецца, пры 40 працэнтах шчыльнасці витрификация магчымая з хуткасцю астуджэння 10 ° C / мін, а пры 60% хуткасць падае да 50 ° C / мін. Але з павелічэннем шчыльнасці криопротекторов, якія трапляюць у сераду, павялічваецца іх адмоўнае ўплыў на замарожванне биоматериалов. Павольная замарозка правакуе навала астуджанай вады ў біялагічным арганізме і ўнутрыклеткавага элемента. Такі стан назіраецца з-за моцнага абязводжвання клеткі пры з'яўленні пазаклеткавай лёду.

Адпаведна, пры атрыманні стеклоподобной структуры спыняюцца хімічныя і фізічныя працэсы абязводжвання арганізма. Нягледзячы на тое што витрификация эмбрыёнаў (што гэта, было падрабязна апісана вышэй) з'яўляецца даволі цяжкай фізічнай сістэмай, матэрыялы такой структуры можна сустрэць у нашай паўсядзённым жыцці (шкло, сілікон і гэтак далей).

Витрификация эмбрыёнаў: водгукі

Дадзены метад збірае толькі станоўчыя водгукі. Працэдура витрификации здзяйсняльная. Але ў ёй ёсць шмат асаблівасцяў на розных стадыях развіцця ў ЭКА-лабараторыях. Витрификация - гэта не найноўшы спосаб криоконсервации жывых клетак. Ён з'яўляецца апошнім этапам павольнай замаразкі. Сёння многія жанчыны маюць магчымасць нарадзіць дзіця дзякуючы навуковым распрацоўкам.

высновы

З прычыны працы многіх навукоўцаў витрификацию можна праводзіць без выкарыстання дарагога запраграмаванага замораживателя, а з ужываннем простага абсталявання, якое кантралюе аператар. Такім чынам, спрашчаецца спосаб і паляпшаецца канчатковы вынік. Нягледзячы на вялікія дасягненні ў криоконсервации, ажыццяўленне правільнага захавання жывых арганізмаў пры нізкай тэмпературы на сённяшні дзень немагчыма.